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推荐使用排枪加样

时间:2019-08-17 11:33来源:未知 作者:admin 点击:
细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-

  细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

  标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.

  请每次测定的同时做标准曲线,建议做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请后乘以总稀释倍数(×n×5)。

  不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

  浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

  本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鼠李糖基转移酶(RLT)水平。用纯化的鼠李糖基转移酶(RLT)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入鼠李糖基转移酶(RLT),再与HRP标记的鼠李糖基转移酶(RLT)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的鼠李糖基转移酶(RLT)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中鼠李糖基转移酶(RLT)浓度。

  以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。

  各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间建议控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

  试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

  血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。

  以上信息由企业自行提供,信息内容的真实性、准确性和合法性由相关企业负责,环保在线对此不承担任何保证责任。

  测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。

  加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40l,然后再加待测样品10l(样品终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

  温馨提示:为规避购买风险,建议您在购买产品前务必确认供应商资质及产品质量。

  本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定食品及相关液体样本中鼠李糖基转移酶(RLT)的含量。

  标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在、第二孔中分别加标准品100l,然后在、第二孔中加标准品稀释液50l,混匀;然后从孔、第二孔中各取100l分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50l,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50l弃掉,再各取50l分别加到第五、第六孔中,再在第五

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